無菌實驗室

 1.無菌室的布局

1.1根据样品检验要求，一般應至少包括更衣緩沖系统、微生物限度检查室、無菌检室、陽性菌室和物流通道。 

1.2更衣系統應至少包括一更（含更鞋）、二更（含洗手）、緩沖以及人流走廊等。

1.3物流通道應考慮淨汙分流的布局，有條件的可設置汙物走廊

2.無菌室的設計要求

2.1淨化級別：潔淨走廊、檢查室、陽性菌室應爲一萬級；其他房間應爲十萬級

2.2氣流組織：陽性菌室對走廊呈負壓，走廊對緩沖有5pa的正壓；陽性菌室全排風

2.3電氣控制：控制開關外置；設置通訊系統

3.結構與要求：

無菌洁净室不宜设在底层，防潮、防霉、采光好，远离交通干道，厕所及污染区，面積不超過10m2，高 度 不  超 過 2.4m，由 兩個 緩 沖 間、操作間 組 成。操作間 緩 沖 間之 間應有樣品傳遞窗，出入操作間和緩沖間的门不應直对。無菌室內應六面光滑平整，無縫隙，不起灰，不落塵，耐腐蝕，易清洗，牆 壁 與 地 面、牆 壁 與 天花 板連 接 處應呈凹 弧 形，操 作間不得安裝下水道。

無菌室內的照明灯應嵌装在天花板內，采光面积要大，光照應分布均匀，光照度不低于300 勒 克 斯。緩 沖 間和操作間應裝有紫外線殺菌燈（2－25w/m3）'用于空氣消毒。紫外線波長200－300nm者具有殺菌作用，其中以265－266nm杀菌作用最强，这與DNA的吸收光譜範圍一致，其殺菌機理可能是在細菌細胞DNA中引起胸腺嘧啶雙聚體形成，從而幹擾細菌細胞DNA複制，導致細菌變異死亡。紫外線殺菌燈1m以內距離殺菌效果最佳，每次開燈照射時間爲30min。應定期檢查紫外線燈輻射強度，不得低于70μW·cm

-21m距離。其缺点是穿透力弱，一张纸板可以阻碍光的透過，不能穿透固體物，故只能用作表面消毒及一些不耐熱或化學消毒劑物品的消毒。

4.溫度、濕度

無菌室內温度和相對濕度直接影响紫外杀菌灯的杀菌效果，故温度最好控制在25±2℃，相對濕度40－60％。操作間或淨化工作台的潔淨空氣應保持對環境形成正壓，不低于

49Pa。

5.操作間

無菌室內應安装空气除菌過濾層流裝置及調溫裝置。潔淨度要求：淨化工作台潔淨度爲100级，無菌室應为10000級。

操作間應准备乙醇灯（或煤气灯），火柴，2％碘酊棉球及75％乙醇棉球、試管架、大小橡皮乳頭、

砂轮、记号笔、無菌剪刀、镊子、注射器等。微生物限度检查無菌室操作間內还應有電子稱（感覺爲0.1g

，最大稱量爲300g爲宜），電動勻漿儀等。

6.緩沖間

緩 沖 間 內 應 有 洗手盆，消毒液，無菌衣，帽，口 罩，拖 鞋 等，緩沖 間內 不 應 放 置 培 養 箱 和 其

他雜物。

（二）無菌室的使用

1.在實驗開始之前1小時啓動風機系統（空調系統），並開啓空氣消毒裝置，消毒至少

半小時後關閉

2.觀察並確保潔淨室的壓差

3.物品經物流通道進入潔淨室

4.人員正確著裝後經人流通道進入潔淨室

5.使用完毕，應用消毒液清洁工作台面。实验人员在更衣室换下無菌工作衣后出洁净工

作室。開啓空氣消毒裝置，消毒至少半小時後，關閉潔淨工作室的控制開關。

（三）無菌室的清潔維護

1.無菌室的清潔維護分为日常维护、定期维护和不符合时的维护。

2.日常維護由每次實驗的實驗人員進行，維護的範圍爲進行實驗的潔淨工作室和輔助潔

淨區，維護的頻率爲每次實驗後。

3.定期維護由實驗室指定專人進行，維護的範圍爲所有潔淨工作室，維護的頻率爲每二周一次。

4.不符合時的維護由實驗人員進行，維護的範圍爲所有不符合的潔淨室，維護的時機爲出現不符合時

（四）無菌室的验证

1.驗證的項目：洁净度、微生物数、换气次数、静压差、照度、温度、相對濕度

2.驗證的技術要求

3. 驗證的周期   建議每半年一次，也可根據潔淨室的使用頻率適當增加驗證次數。

4. 驗證的方法   潔淨度和微生物數：采用GB/T16292~16294-1996，其他項目：參照JGJ71－90。

5. 驗證不符合項的處理

5.1当洁净度、微生物数、换气次数、静压差等指标出現不符合時，應停用洁净室，对净化系统进行调整后，在重新验证，直至符合规定才能重新启用洁净室。